摘要:以日本圆叶海棠新梢茎尖或带腋芽茎段为材料，进行组培快繁。诱导培养基为MS+6-BA0.3mg/L(单位下同)+NAA0.03;增殖培养基为MS+6-BA0.2+NAA0.02;壮苗培养基为MS+6-BA0.1+NAA0.02;生根培养基为1/2MS+IBA0.1+IAA0.2。增殖系数7~8;生根率98%;移栽成活率86%。
关键词:日本圆叶海棠;组培快繁技术
中图类号:S661.4　文献标识码:A　文章编号:1002-2910(2008)02-0056-02

日本圆叶海棠盆景(Malus prunifolia Borkhvar.ringo Asami)，别名丸叶海棠，是日本培育苹果苗木中广泛应用的一种基砧，其显著特点是扦插繁育能力强，扦插成活率可达90%以上。经过组培脱毒的圆叶海棠生长量大，抗逆性强，嫁接亲和性好，具有更稳定的生长势，用圆叶海棠扦插繁殖取代实生播种繁殖是苹果育苗中的一次革命。本文建立的日本圆叶海棠快繁体系，可在短期内获得大量无毒无性系砧木，实现周年生产，满足苹果苗木生产对砧木的需求。

1　培养条件

①诱导培养基:MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.03m/L;②增殖培养基:MS+6/-BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L;③壮苗培养基:MS+6/-BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L;④生根培养基:1/2MS+IBA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。前3种培养基均加蔗糖35g/L，生根培养基蔗糖为23g/L，pH值5.8，培养温度为25℃，光照强度为1500~2000Lx，光照时间为14小时/天。

2　生长与分化情况

2.1　无菌材料的处理
选取日本圆叶海棠春季萌发抽生的新梢茎尖或带腋芽的茎段，剪成长3~5cm的茎段置于三角瓶中，先用少许洗衣粉浸洗2~3分钟，然后用自来水冲洗到没有泡沫为止，在超净工作台上，用0.1%HgCl2消毒8分钟，再用无菌水淋洗5~6次，滤纸吸干水分，剪成长1~2cm的单芽茎段或带几个较小叶片的茎尖，接种于诱导培养基上。

2.2　不定芽的分化及丛生芽增殖
芽在诱导培养基上培养20天后开始萌动，伸长成无菌苗。在无菌条件下，将上述伸长苗再切段，每段1~2个芽，接入增殖培养基中，30天后可产生大量丛生芽，将丛生芽再切段，接种在相同培养基上继代培养。增殖系数为7~8。

2.3　壮苗培养
在增殖培养基中，获得大量的丛生芽，但芽分化较多，植株生长较细弱，因此，将经过继代增殖的小植株，在生根前接种在壮苗培养基中，进行壮苗培养，获得健壮的无根试管苗。

2.4　诱导生根及移栽
取株高2.5~3cm小苗接种到生根培养基上培养2周左右，生根率达98%。然后在调控温室驯化生根20天，当试管苗根长2~3cm、茎干微呈红色、叶大而浓绿时，开口练苗3天，然后用镊子夹出试管苗，栽入已配好营养土(珍珠岩、麦茬土和河沙按1:2:1混合)的六棱型营养钵中，用0.1%多菌灵消毒后，保持80%的湿度，两周后开始长出新根和新叶，成活率达86%。当长出2~4片真叶时开始移人大田，成活率达98%。