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钻石玫瑰怎样组培快繁技术研究
2013-04-22 11:06:21  浏览:28

孙瑞芳,何定萍

    摘要:研究表明,适宜钻石玫瑰离体茅诱导分化的培养基为MS+ 6-BA0.50 mg/L+ NAAO.10 - 0.20 mg/L;适宜丛生茅继代增殖的培养基为MS+ 6-BAI.OO mg/L+ NAAO.IO - 0.20 mg/L;适宜试管苗生根的培养基为1/2MS+ NAAO.IO mg/L,其生根率达90%。

    关键词:钻石玫瑰;组织培养;繁殖;培养基
   
    钻石玫瑰为月季花中的微型系列品种,因其花枝短小,花朵很小,故名“钻石玫瑰”或“袖珍玫瑰”,属蔷薇科多年生宿根花卉。每株可同时绽放30 - 50朵花,色彩鲜艳,适合园林布置花坛,路带花境,草坪点缀,也适合盆花造型,美化家庭住宅,点缀厅堂居室,深受广大群众的喜爱。它除具有一般月季花容秀美、千姿百态、芳香馥郁、四季常开等特点外,还具有分枝多、株形灌从状、花美、耐寒、耐热、适应性强、花团锦簇等优点,是现代城市绿化不可替代的材料。

目前钻石玫瑰主要靠扦插繁殖,繁殖率低、速度慢,且后代出现品质降低现象,远远不能满足市场的需求。为此,我们开展了钻石玫瑰组培快繁技术研究,现将结果报道如。

钻石玫瑰怎样组培快繁技术研究
     
1 材料与方法
1.1材料
  供试材料采自重庆市园林绿化科学研究所种植的钻石玫瑰品种“紫色时代”二年生植株。


1.2方法
1.2.1外植体的建立
    剪取优良健壮植株当年生枝条中段(带饱满而未萌发的侧芽),用毛刷蘸肥皂水轻轻刷洗后流水冲洗l-2h,再剪成l.O - 1.5 cm带腋芽的茎段;超净台上,将茎段先用70%酒精溶液浸泡30s,无菌水冲洗2-3次,再置于0.1%升汞溶液中消毒9 - 12 min,然后用无菌水冲洗4-5次,以备接种。


   
1.2.2离体芽的诱导培养
    将准备好的钻石玫瑰无菌茎段接种于诱导培养基上诱导萌芽。诱导培养基以MS为基本培养基,附加不同浓度的细胞分裂素6-BA和生长素NAA,分别为:MS+ 6-BA0.30 mg/L+ NAAO.IO mg/L, MS+6-BA0.50 mg/L+NAAO.IO mgL,MS +6-BA0.50 mg/L+NAA0.20 mg/L.MS+6-BAI.O mg/L+NAA0.20 mg/L, MS +6-BA2.00 mg/L+NAAO.IO mg/L。每种培养基均接种20个离体芽,培养6周后统计芽分化率。
   
1;2.3丛生茅的继代增殖培养
    将诱导培养基上已萌发的嫩芽切下转接到4种继代培养基中继代增殖。继代培养基分别为MS+ 6-BA050 mg/L+ NAAO.10 mg/L,MS+6-BAI.OO mg/L+NAAO.IO mg/L,MS+6-BAl.OO mg/L+NAA0.20 mg/L,MS+ 6-BA2.00 mg/L+ NAA0.20 mg/L。每种培养基均接30个嫩芽,接种时单芽茎段高均在1.5 cm以下。培养3周后统计丛生芽的数量以及高于2 cm的芽数。
   
1.2.4试管苗的生根培养

    选取继代培养中生长健壮的丛生芽,剪成2.0 - 2.3 cm长的单芽茎段,转接到生根培养基上。培养基配方为:l/2MS+ NAAO.IO mg/L、1/2MS+IBAO.1 mg/L、1/2MS+NAA0.20 mg/L、l/2MS+IBA0.20 mg/L、1/2MS+ NAA0.50 mgiL、1/2MS+ IBA 0.50 mg/L。每种培
养基接种30个茎段,接种15天后统计幼苗生根情况。

钻石玫瑰怎样组培快繁技术研究

    所有供试培养基、MS培养基中的白砂糖浓度均为30.0 g/L,l/2MS培养基中白砂糖浓度为20.0 g/L,琼脂均为3.5 g/L,pH5.8;培养室温度(23±2)℃,光照强度2 000 -3 000 lx,光照时间12 h/d。
   
2结果与分析

2.1离体芽的诱导

    钻石玫瑰离体芽的诱导较慢,接种28天后离体芽才开始萌动,但芽萌动后的生长情况因培养基激素浓度的不同而不同,培养结果统计(表1)表明,在诱导培养过程中,MS+ 6-BA0.30 mg/L+ NAAO.IO mg/L培养基丛生芽少,芽分化宰相对较低(70%),可能足由于6-BA浓度偏低,但丛十芽往培养基中生长健壮;在MS+ 6-BAI.OO mg/L{  NAA0.20 mg/L培养基上,丛生芽相对较少,芽分化率为105%,H从乍芽生长细弱,说明该培养基中6-BA和NAA浓度配比不当;芷MS{ 6-BA2.00 mg/L+ NAAO.lO mg/L培养基I:离体芽荫动后仅产生愈伤组织,未分化出丛生芽,可能山于6-BA浓度过高;MS} 6-BA0.50 mg/L l NAA0.10 mg/L和MS l 6-BA0.50 mg/L+ NAA0.20 mg/L两种培养基上,离体芽的分化率分别达245%和195%,且丛生芽生长健壮。重复试验后确定适宜离体芽诱导的培养基为MS I 6-BA0.50 mg/L+NAAO.IO - 0.20mg/L。
   
2.2丛生芽的继代增殖

    钻石玫瑰在所采用的4种继代增殖培养基上培养3周后,芽的增殖倍数和人J"2 cm芽的比率存在差异(表2)。其中:在MS+ 6-BAI.OO mg/L NAAO.IO mg/L、MS}  6-BAI.OO mg/L+ NAA0.20 mg/L两种培养基上,增殖的丛生芽多,且芽生长健壮:,芽的增殖倍数分别为5.67倍和5.2倍,大干2 cm芽占75.2g%和71.7g%,明显高于其它培养基;在MS+ 6-BA0.50 mg/L l  NAAO.lO mg/L培养基上,芽生长细弱,丛生芽少,增殖倍数仅为2.1倍,大于2 cm的芽^18.75%;MS+ 6-BA2.00 mg/L I NAA0.20 mg/L培养基可能因6-BA浓度过高,继代芽产生愈伤组纵后停止牛长分化。蘑复多次结果同上。山此可见,适宜钻石玫瑰继代增殖的培养荩为MS}6-BAI.OO mgfL}  NAAO.IO -0.20mg/L。
   
    2.4生根试管苗的驯化移栽

  将生根试管苗放在光线明亮的地方,闭瓶炼苗2-3天,再逐渐开瓶炼苗2-3天,让植株经受试管外环境的锻炼。然后,取出试管苗洗净基部牯附的培养基,栽在用珍珠岩、腐殖土、炉渣(1:3:3)配成的基质中,浇浓度为0.8 g/L多菌灵溶液,遮荫保湿,空气湿度保持在60%一70%,当植株长出新根后让其逐渐见光,并降低湿度,直至暴露在外界条件下,移栽成活率可达75% - 80%。
 
3小结
    3.1细胞分裂素6-BA和生长素NAA作为外源激素加入培养基后,对钻石玫瑰离体芽的诱导及分化影响十分显著。适宜钻石玫瑰离体芽诱导的培养基为:MS+6-BA0.50 mgtL+NAAO.IO - 0.20 mg/L;适宜丛生芽继代增殖的培养基为MS+6-BAI.OO mg/L+NAAO.10 -0.20mg/L。

  3.2钻石玫瑰在试管内生根需较低浓度的生长素NAA和IBA,当NAA大于2.Omg/L时,钻石玫瑰虽能产生根,但根随即变成灰褐色而停止生长。试验表明,诱导钻石玫瑰试管苗生根的最好培养基为l/2MS+ NAAO.IO mg/L,生根率可达90%。

    3.3  用组织培养方法可以提高钻石玫瑰的繁殖速度,且植株根系发达,生长健壮,苗木整齐,是批量繁殖生产钻石玫瑰商品苗的一种好方法。