3测量指标与方法

 

3.1百合形态指标的测量

 

    钙溶液处理一周后开始进行植物生物量的测定，株高、茎粗、叶长和叶宽等形态指标，以后每7d测量一次，到第63d结束。百合盆栽株高是从茎杆的第一个叶痕处到百合冠层顶端的垂直高度，使用卷尺进行测量。

    

    茎粗为用游标卡尺测得的子叶节的第一节间的直径(杨爽，2012)。叶片长、宽是百合冠层顶端向下第三、四、五片叶子的长、宽均值。叶烧指数依据分级标准及计算公式计算(同2.1.3 )，每一处理测量10株，试验重复3次。

    

    3.2石蜡切片的制作方法 

    

    石蜡切片的制作参照前人方法(郭蕊等，2006)。选择发病部位百合叶片，切成长宽约0.3 mm的方形碎片，用50% FAA固定液(50%酒精:甲醛:冰乙酸=16:1:1)，置于4 0C冰箱中固定24 h。然后用浓度为70%, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 100%的酒精进行梯度脱水。之后依次用1/3 TO(生物透明剂)+2/3酒精、1/2 TO +1/2酒精、2/3 TO+1/3酒精以及两次纯TO进行透明。再在“℃烘箱中浸蜡使TO挥发。根据叶片老嫩程度选择浸蜡时间为15d。

    

    将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中，使蜡凝固，此过程中防止气泡产生以及凝蜡不匀。蜡块制好后用切片机切片，厚度10-15 }rri。紧接着进行展片、烤片、烘片，温度都为45 0C。对切片进行脱蜡、染色后即可观察，选择细胞结构清晰地切片拍照。所用仪器为Olympus生物显微镜。

    

    3. 3数据统计分析

    

    采用Microsoft Excel 2010进行数据整理和绘制图表;采用DPS7.05软件进行数据统计分析。