大花扶郎组培快繁技术:6-BA与ZT对增殖系数及试管苗苗质的影响分析
摘要
本文系统分析6-BA浓度、细胞分裂素种类、增殖阶段激素组合及继代培养周期对大花扶朗(非洲菊)试管苗增殖系数与苗质的影响。结果表明,6-BA浓度与增殖系数正相关,但过高会降低苗健壮度并引发玻璃化;ZT在苗质协同性上优于6-BA;增殖阶段6-BA过高抑制生根;继代周期以30-35天为宜,为优化快繁体系提供科学依据。
关键词
大花扶朗、6-BA、增殖系数、苗质、ZT、继代周期、生根抑制、快繁技术
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6-BA浓度对增殖系数和苗质的影响
6-BA浓度对增殖系数和苗质的影响
健壮的大花扶朗试管苗接种在含6-BA(6-苄基腺嘌呤)0-4毫克/升的MS培养基上,6-BA浓度和月增殖系数之间成正相关关系,6-BA浓度每提高0.5毫克/升,那么增殖系数就增加1(表2)。与此同时,当6-BA浓度超过1.5毫克/升时,浓度提高,试管苗的健壮度就下降。在6-BA浓度增加到2.3毫克/升时,经过2次继代,其增殖的丛生苗就分不清生长点了。
如果再继代培养,将可能出现玻璃化或材料丧失利用价值的情况。这与多数试验结果一致。对于增殖系数高的品种应降低细胞分裂素的浓度,以便获得较多的壮苗。对于增殖系数低的品种可以采用低—高—低—高的激素调控去适当提高增殖系数。但是总的原则是,在保证经济繁殖系数的前提下使用尽可能低的细胞分裂素浓度。
细胞分裂素种类对苗质的影响
2 细胞分裂素种类对苗质的影响
在MS加NAA(萘乙酸)0.2毫克/升培养基中分别添加2毫克/升的6-BA和2毫克/升的ZT(玉米素),培养4周,然后继代1次,再培养4周,统计增殖系数。结果添加6-BA的增殖系数为5.5,添加ZT的为5.1(表3),相差不明显。然而添加ZT的一组,叶片生长匀称,叶色较深。而添加6-BA的一组叶片中脉粗大,叶肉少,株与株之间很难分清和剥离。经分组浓度梯度随机配比试验,6-BA与NAA的交互作用和ZT与NAA的交互作用之间差异未达到显著水平。但试验显示ZT在大花扶朗快繁过程中对植株发育协同性要较6-BA好。
增殖阶段6-BA浓度对生根的影响
3 增殖阶段6-BA浓度对生根的影响
增殖培养基中6-BA含量愈高,对生根的抑制愈严重(表4),这已经在很多植物上得到证实。考虑到经济合理的增殖系数,扶朗增殖阶段用1.5毫克/升左右的6-BA为宜。当以6-BA配合NAA使用时,所有浓度的NAA都使增殖系数下降,当NAA的浓度高于0.3毫克/升时,愈伤化与NAA的浓度成正相关。低于0.3毫克/升的NAA可以使所增殖的幼苗生长健壮,叶色变深。
继代培养周期对增殖的影响
4 继代培养周期对增殖的影响
在MS加6-BA1.0毫克/升和NAA1毫克/升的培养基上,随着培养时间的推移,接种的材料不断萌生丛芽,20天时达到高峰,以后丛芽萌生的速率快速降低,到35天前后几乎不再萌生幼芽。随着萌生速率的降低已萌生幼芽生长加快,直至长成高5厘米左右的幼苗。
从幼芽萌生到长成完整的无根小株约需7-10天时间。40天后幼苗不再增殖和长大,而叶片数将继续增加。这样将会增加继代接种的工作量,所以大花扶朗的继代周期以30-35天较适宜。