大戟属３个品种植株离体培养试验研究

 

本试验通过大戟属３个品种多肉植株离体培养体系的建立，研究不同灭菌处理及不同植物生长调节剂对植株芽诱导、增殖和生根培养的影响。

 

目前大戟科植物多采用茎段直接进行芽诱导建立快繁体系，相关研究表明，采用芽诱导离体培养能够保持母本的优良性状，且变异率相对较低ｐ９］，同时可缩短培养周期，从而快速大量的获得无菌苗。外植体的灭菌处理是建立快繁体系的基础，结果表明，‘膨珊瑚’最佳灭菌时间为１１ｍｉｎ，‘膨珊瑚缀化’最佳灭菌时间为１３ｍｉｎ，‘绿玉树’最佳灭菌时间为９ｍｉｎ。

 

试验中发现外植体的幼嫩程度对灭菌效果也会产生影响，大戟属３个品种植株最佳外植体选材为半木质化茎段（上段）及顶端，染菌程度均较低，易于消毒，这与大戟科乌桕属乌桕［９９］的研宄结果一致，研宄结果表明幼嫩茎段与远离地面的取材部位灭菌效果相对较好。

 

植物组培快繁的成功与否与植物生长调节剂的选择具有密切的关系，同时培养基类型的选择也是离体培养成功与否的关键。本试验通过对比发现，〗／２ＭＳ培养基较ＭＳ培养基芽萌发率高，在ＭＳ培养基中出芽困难且所需激素浓度较大，这与刘召亮的研宄结果一致［？。韦弗研究发现，植物生长调节剂中细胞分裂素与生长素具有协同作用ｔ１Ｗ）］，通过调整细胞分裂素与生长素的添加比例可控制外植体的芽诱导效果。

 

有研宄发现细胞分裂素常被用于研究芽的诱导与增殖，常见的细胞分类素有６－ＢＡ、２丁等［４４］，本试验通过调整６－ＢＡ与ＮＡＡ的比例，从而筛选出促进芽诱导与生长的最佳培养基，结果表明：‘膨珊瑚’芽诱导最佳培养基〗／２ＭＳ＋１．２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ，‘膨珊瑚缀化’芽诱导的最佳激素配比为１／２ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ，‘绿玉树’芽诱导的最佳激素配比为ｌ／２ＭＳ＋１．０ｍｇ／ＬＺＴ＋０．０２ｍｇ／ＬＮＡＡ。

 

外植体的幼嫩程度对芽诱导影响效果显著，本试验通过对比发现，以半木质化茎段（上段）为外植体，芽较健壮且出芽快，顶端由于营养物质储存少而导致出芽迟缓，说明外植体生理时期的不同会影响芽诱导效果，较幼嫩的茎段对芽诱导有利，这与张玲玲研宄结果一致外植体的不同接种方式也会不同程度地影响萌芽诱导，大戟属３个品种植株外植体最佳接种方式为形态学下端竖插于培养基，芽萌发较快，表明芽诱导的情况与生长素的极性运输有密切关联，这与蒋丽娟的研究结果一致。

 

细胞分裂素主要应用于芽增殖试验中，本试验研宄结果表明，ＺＴ对芽增殖影响效果明显。有研宄发现，ＧＡ３可促进芽继代增殖同时可加速茎的伸长生长［９Ｓ］，本试验研宄结果表明：未添加ＧＡ３的培养基中，芽伸长生长困难，ＧＡ３对芽增殖影响效果不显著，但能有效促进植株茎的伸长生长，这与陈贻金的研宄结果一致＠３］。

 

大多数生根试验采用１／２ＭＳ为基本培养基，其Ｎ、Ｐ、Ｋ盐含量较ＭＳ培养基少，利于植物生根，本试验同样以１／２ＭＳ培养基添加适当浓度的生长素进行生根诱导，探讨ＮＡＡ、ＩＢＡ对植株生根的影响，结果表明：大戟属３个品种植株在添加ＮＡＡ或ＩＢＡ的培养基上均可生根，但ＮＡＡ对生根的促进作用相对较好，‘膨珊瑚’与‘膨珊瑚缀化’以添加０．３０ｍｇ／ＬＮＡＡ的生根效果最佳，‘绿玉树’以添加０．５０ｍｇ／ＬＮＡＡ的生根效果最佳，这与黄文江，刘庆忠等人认为０．５ｍｇ／ＬｌＢＡ＋０．５０ｍｇ／ＬＮＡＡ较适合一品红生根的研宄结果不一致［１（）５］，说明即使同科同属植物，其生根对生长素浓度的需求也不同。

 

无菌苗的驯化移栽是植物组织培养向生产实践转化的关键。大戟属３个品种植株是一类特殊的肉质茎花齐，移栽前进行炼苗可大大提升植株成活率。有研究发现，无菌苗移栽时应保持湿度、避免强光，从而减少水分蒸腾，而移栽基质的选择应遵循保水保肥、透气性好的原则本试验通过对比发现，细沙保水性差，根系易缺水死亡，采用草炭：细沙＝２：１配比的基质，可同时满足营养物质的供给及透气性要求，植株驯化成活率高。