大戟属三个品种植株离体培养试验研究

 

大戟属３个品种植株为一类独特的观茎多肉植物，通常可用于多肉微景观组合盆栽，从而丰富植物层次，亦可以独立成景，打造简约家居或办公环境，同时便于管理，因而其市场潜力巨大。

传统的繁殖方式受地域环境影响较大，且扦插繁殖影响了母本的观赏价值，同时种苗整齐度较差，难以进行大批量生产以及标准化育苗。本章以大戟属３个不同品种植株的肉质茎为试验材料，建立高效的离体快繁技术体系，以获得性状稳定、品性优良的种苗，进而为植株的规模化生产与推广应用提供技术理论支撑。

 

２．１试验材料

 

试验材料来源于宁夏园艺产业园科研基地，品种分别为‘膨珊潮’（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｏｎｃｏｃｌａｄａ）、‘膨现潮缀化，（ＥｕｐｈｏｒｂｉａｏｎｃｏｃｌａｄａＤｒａｋｅｆｃｒｉｓｔａｔａ）、‘绿玉树，（ＥｕｐｈｏｒｂｉａｔｉｒｕｃａＨｉ）。试验选用的外植体为生长健壮植株的肉质茎。Ａ１代表‘膨珊瑚’品种，Ａ２代表‘膨珊糊缀化’品种，Ａ３代表‘绿玉树’品种。试验地位于宁夏园艺产业园组织培养实验室：温度２３±２°Ｃ，光照２０００１ｘ。

 

２．２试验方法

 

２．２．１外植体灭菌处理

 

２.2．1．1消毒时间对不同品种植株灭菌的影响

 

以‘膨珊瑚’、‘膨珊糊缀化’、‘绿玉树’的肉质茎为外植体，先用洗洁精浸泡清洗，再用流动水冲洗ｌｈ，冲洗干净后置于超净工作台上进行灭菌。先用７５％酒精消毒３０ｓ，无菌水冲洗３遍，再用０．１％ＨｇＣｋ溶液进行灭菌处理，‘膨珊瑚’与‘绿玉树’灭菌７ｍｉｎ、９ｍｉｎ、１１ｍｉｎ、１３ｍｉｎ，‘膨珊糊缀化’灭菌８ｍｉｎ、１１ｍｉｎ、１３ｍｉｎ、１５ｍｉｎ，灭菌过程中需不断振荡，保证外植体与ＨｇＣｈ溶液充分接触，灭菌后无菌水冲洗３次，将各外植体接种于ＭＳ培养基中，每个处理接种３０瓶，重复３次，２５ｄ后统计污染率与褐变率。污染率（％）＝（污染的外植体数／接种的外植体总数）Ｘ１００％；褐变率（％）＝（褐变的外植体数／接种的外植体总数）Ｘ１００％。

 

２．２．１．２外植体幼嫩程度对不同品种植株灭菌的影响

 

以大戟属３个品种植株的肉质茎为外植体，分别采集各品种不同幼嫩程度垄段若干，分类后采用相同的灭菌处理，接种于ＭＳ培养基中，３０ｄ后统计污染率、死亡率与存活率。存活率（％）＝（存活的外植体数／接种的外植体总数）ｘｌ００％。

 

２．２．２不同品种植株萌芽培养研究

 

２．２．２．１不同品种植株芽诱导培养研究

 

以大戟属多肉植物‘膨珊瑚’、‘膨珊瑚缀化’、‘绿玉树’的肉质茎为外植体材料，设置不同营养水平的培养基，添加不同浓度的６－ＢＡ、ＮＡＡ、ＺＴ等外源激素，进而诱导芽的产生。试验采用三因素三水平正交试验，进行不同激素组合的诱导比较，将灭菌后的外植体分别切成约０．５ｃｍ的茎段和ｌｃｍ２的茎块接种于芽诱导培养基中（表２－１、２－２、２－３、２＊４、２－５、２￣６），每个处理３０瓶，重复３次，３０ｄ后统计芽诱导率与生长状况，筛选出各品种植株最佳芽诱导培养基。芽诱导率（％）＝（芽萌发外植体数／外植体总数）ｘｌ〇〇％。

 

２．２．２．２外植体幼嫩程度对芽诱导研究

 

分别以大戟属３个品种植株不同幼嫩程度的肉质茎为外植体，分析比较不同幼嫩程度外植体顶芽、半木质化茎段（上段）、半木质化莲段（下段）对芽诱导的影响。每个处理３０瓶，每瓶接种１个，重复３次，３０ｄ后统计芽生长状况Ｄ

 

２．２．２.3不同接种方式对芽诱导研究

 

以大戟属３个品种植株的肉质茎为外植体，采用２种不同的接种方式进行芽诱导比较，２种接种方式分别为形态学下端竖插于培养基与水平放置。每个处理３０瓶，每瓶接种１个，重复３次，３０ｄ后统计芽萌发率与褐化率。